核糖核酸酶A（RNase A）來源于牛胰臟，是一種內(nèi)切核糖核酸酶，可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3’端，切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵，反應(yīng)終產(chǎn)物是3’嘧啶核苷酸和末端帶3’嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時，核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑（RNasin）或氧釩一核糖核苷復(fù)合物（vanadyl—ribonuclosidecomplex，VRC）所抑制。RNase A的反應(yīng)條件極廣，且極難失活。在低鹽濃度（0～100 mmol/l NaCl）下，RNase A切割單鏈和雙鏈RNA、DNA：RNA雜交體中的RNA；當(dāng)NaCl濃度為300 mmol/l?；蚋邥r，RNase A就特異性切割單鏈RNA。去除反應(yīng)液中的RNase A，通常需要蛋白酶K處理、酚反復(fù)抽提和乙醇沉淀。
pH緩沖液是確保pH測量值精確的重要因素。標(biāo)準(zhǔn)緩沖液用于校準(zhǔn)pH 傳感器和檢查其性能。pH緩沖液的緩沖能力是其重要的屬性。即使將外部物質(zhì)加入緩沖液中，這一屬性仍可使pH緩沖液保持恒定的pH值。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(RM)reference material(RM):是一種已經(jīng)確定了具有一個或多個足夠均勻的特性值的物質(zhì)或材料，作為分析測量行業(yè)中的"量具"，在校準(zhǔn)測量儀器和裝置、評價測量分析方法、測量物質(zhì)或材料特性值和考核分析人員的操作技術(shù)水平，以及在生產(chǎn)過程中產(chǎn)品的質(zhì)量控制等領(lǐng)域起著不可或缺的作用。
如果你的質(zhì)粒正好比較大，又沒有經(jīng)驗，選擇特別注明可以轉(zhuǎn)大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染試劑成功幾率會高一些。有的轉(zhuǎn)染試劑還會提供一些促進(jìn)DNA凝聚的成分，使得DNA形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物時更致密一些，更容易轉(zhuǎn)染一些。純化質(zhì)粒的質(zhì)量也會影響轉(zhuǎn)染效率，一定要選擇高質(zhì)量的質(zhì)粒。
Trizol試劑是直接從細(xì)胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心，樣品能分成水樣層和有機(jī)層。而RNA存在于水樣層中。在收集上面的水樣層后，RNA可以通過異丙醇沉淀的方法來還原。在除去水樣層之后，樣品中的核酸和蛋白也能相繼以沉淀的形式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，在有機(jī)層中加入異丙醇能析出有機(jī)層的蛋白。
生成沉淀法。例如NaCl 溶液里混有少量的MgCl2 雜質(zhì)，可加入過量的NaOH 溶液，使Mg2+離子轉(zhuǎn)化為Mg(OH)2 沉淀（但引入新的雜質(zhì)OH–），過濾除去Mg(OH)
關(guān)注微信下單
