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資料信息
  • 27 2024-06
    Trizol法提取RNA原理以及詳細步驟

    Trizol試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中,Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心,樣品能分成水樣層和有機層。而RNA存在于水樣層中。在收集上面的水樣層后,RNA可以通過異丙醇沉淀的方法來還原。在除去水樣層之后,樣品中的核酸和蛋白也能相繼以沉淀的形式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA,在有機層中加入異丙醇能析出有機層的蛋白。

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  • 26 2024-06
    無機物溶液常用的分離和提純方法

    生成沉淀法。例如NaCl 溶液里混有少量的MgCl2 雜質(zhì),可加入過量的NaOH 溶液,使Mg2+離子轉(zhuǎn)化為Mg(OH)2 沉淀(但引入新的雜質(zhì)OH–),過濾除去Mg(OH)

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  • 25 2024-06
    凝膠過濾分離效果不理想的因素


    由于凝膠層析的分離原理是分子篩作用,它不象其它層析分離方式主要依賴于溶劑強度和選擇性的改變來進行分離,在凝膠層析中流動相只是起運載工具的作用,一般不依賴于流動相性質(zhì)和組成的改變來提高分辨率,改變洗脫液的主要目的是為了消除組分與固定相的吸附等相互作用,所以和其它層析方法相比,凝膠層析洗脫液的選擇不那么嚴格。

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  • 24 2024-06
    免疫定量分析中標準品的制備要求

    標準品是標記免疫分析定量的依據(jù)。標準品的正確與否直接影響樣品的測定結(jié)果。如果在連續(xù)測定中,或各實驗室之間使用的標準品不一致,則可影響到實驗結(jié)果的可比性。為此,對標記免疫分析所使用的標準品應(yīng)滿足如下要求。

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  • 21 2024-06
    蛋白質(zhì)的鹽析與透析實驗分析

    蛋白質(zhì)溶液用透析除鹽時,正負離子透過半透膜的速度不相同,如(NH4)2SO4中的?透析速度快,而透析過程中膜內(nèi)的?會生成H2SO4,使膜內(nèi)蛋白質(zhì)溶液呈酸性。因此,為避免蛋白質(zhì)變性,用鹽析法純化蛋白質(zhì)時,開始時應(yīng)用0.1mol/L的NH4OH透析。此外,為了保證蛋白質(zhì)在透析過程中不發(fā)生變性,可以將透析過程置于低溫下進行。
     

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  • 20 2024-06
    RNA 和 DNA 提取實驗中的問題解決

    降解問題是RNA制備中常常到的問題。因為在 RNA 提取過程中,樣品儲存不當或裂解效率低等情況都會導致降解。對于 DNA 提取,降解不是一個大問題,因為對于 PCR,DNA 可以被剪切并且工作正常,如果不希望有較多剪切的 DNA,可以使用弱裂解的方法。

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  • 19 2024-06
    熒光定量PCR體系各種加樣問題解答

    PCR技術(shù)問世于上世紀80年代。問世之初的PCR體系比較大,動輒以毫升計?,F(xiàn)在的PCR體系要精巧多了,總體積可大可小。我們常接觸到的常規(guī)PCR以及熒光定量PCR的體系一般都在幾十微升,小到可以10微升左右。

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  • 17 2024-06
    培養(yǎng)基的配制原理與操作步驟

    培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境,培養(yǎng)基種類很多。

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  • 14 2024-06
    瓊脂糖凝膠電泳實驗原理與注意事項

    DNA片段瓊脂糖凝膠電泳的原理與蛋白質(zhì)的電泳原理基本相同,DNA分子在高于其等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。DNA分子在電場中通過介質(zhì)而泳動,除電荷效應(yīng)外,凝膠介質(zhì)還有分子篩效應(yīng),與分子大小及構(gòu)想有關(guān)。

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  • 13 2024-06
    多重qPCR探針的熒光基團的基本要求

    不同熒光基團的熒光強度是有高有低的,例如FAM就是一個熒光強度相對較高的基團,我們偏向于將其安排給相對表達量比較低的目的基因,而熒光強度相對較低的基團可以用于檢測表達量比較高的如看家基因等,這樣會達到擴增曲線平臺期接近的目的,結(jié)果會比較美觀。

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