重組蛋白分為凍干粉和溶液態(tài)兩種保存形式,原核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為凍干粉狀態(tài),真核細(xì)胞表達(dá)的重組蛋白為溶液態(tài)保存,這樣使得重組蛋白非常穩(wěn)定,在 -80℃ 條件下可保存數(shù)年。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系(穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株)指在細(xì)胞中持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)特定基因或干擾特定基因表達(dá)。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的目的基因質(zhì)粒DNA整合到細(xì)胞染色體上,使細(xì)胞長期穩(wěn)定表達(dá)該基因。穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株包括多克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株和單克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株。慢病毒感染目的細(xì)胞后,通過抗性基因篩選得到的細(xì)胞株是多個(gè)細(xì)胞克隆的組合。單克隆細(xì)胞株是從多克隆細(xì)胞中經(jīng)細(xì)胞克隆挑選得到的,由一個(gè)細(xì)胞擴(kuò)增得到的細(xì)胞株。單克隆細(xì)胞株性狀統(tǒng)一,傳代過程中細(xì)胞的基因表達(dá)保持穩(wěn)定。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))是一種常用的血清學(xué)檢測方法,可以用于檢測各種生物分子,如抗體、抗原等。在ELISA實(shí)驗(yàn)中,將抗原或抗體包被在固相載體上,加入待測樣本,再加入酶標(biāo)抗體或抗原,最后加入底物顯色。通過顯色情況來判斷待測樣本中是否含有目標(biāo)抗原或抗體。
將動(dòng)物組織或細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,在模擬機(jī)體內(nèi)的生長環(huán)境條件下,使其在體外環(huán)境繼續(xù)生長增殖的過程,稱為細(xì)胞培養(yǎng)。
染色是生物顯微玻片標(biāo)本制作中最重要的環(huán)節(jié)之一。先把破壞細(xì)胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內(nèi),使組織細(xì)胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產(chǎn)生不同的折射率,以便觀察。
根據(jù)實(shí)驗(yàn)室使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的具體情況和影響因素來確定期間核查的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在使用過程中影響穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性的因素很多, 它受化學(xué)、物理和生物等因素的影響。
細(xì)胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染。
將一般細(xì)菌的菌種純化后接種于普通肉湯管,4~6h增菌后,加入適量甘油一生理鹽水保存液,-20℃冰箱保存;鏈球菌屬和奈瑟氏菌屬的菌株純化后接種于血清肉湯管,在5%~10%CO2中經(jīng)8~10h增菌后,加入適量保存液,80℃低溫冰箱保存;真菌菌種純化后直接取菌洗入肉湯,不做培養(yǎng),加入保存液后,-20℃冰箱保存。結(jié)果在連續(xù)3年實(shí)驗(yàn)期內(nèi),各菌種保存效果良好,且其形態(tài)結(jié)構(gòu)、染色特性、生化反應(yīng)等與標(biāo)準(zhǔn)株相符。結(jié)論使用甘油生理鹽水保存法來保存菌種,各菌種保存時(shí)間長,方法簡便,特別是使鏈球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般實(shí)驗(yàn)室得以保存。