Western Blot顯色的方法主要有以下幾種： i. 放射自顯影 ii. 底物化學發(fā)光ECL iii. 底物熒光ECF iv. 底物DAB呈色 現(xiàn)常用的有底物化學發(fā)光ECL和底物DAB呈色，體同水平和實驗條件的是用第一種方法，目前發(fā)表文章通常是用底物化學發(fā)光ECL。只要買現(xiàn)成的試劑盒就行，操作也比較簡單，原理如下（二抗用HRP標記）：反應底物為過氧化物+魯米諾，如遇到HRP，即發(fā)光，可使膠片曝光，就可洗出條帶。
支持物是人工合成的交聯(lián)高聚物，在水中膨脹后成為凝膠。凝膠內(nèi)為內(nèi)水層，凝膠周圍的水為外水層?？刂平宦?lián)度以形成不同孔徑的網(wǎng)狀結構。交聯(lián)度小的孔徑大，交聯(lián)度大的孔徑小。
在部分實驗室，由于血清和培養(yǎng)條件等差異，轉染后鏡下培養(yǎng)基中可能出現(xiàn)少量黑點狀沉淀，為轉染試劑和血清中蛋白結合產(chǎn)物，不影響轉染結果和細胞狀態(tài)，可通過換液除去。
無血清培養(yǎng)基，顧名思義，就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少血清帶來的不利因素，使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可簡化純化和鑒定各種細胞產(chǎn)物的程序，避免病毒污染造成的危害。
