酸堿指示劑一般是有機弱酸或弱堿,它們的共軛酸堿對具有不同結構而呈現(xiàn)不同顏色。當溶液的pH改變時,指示劑得到質(zhì)子,由堿式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹椝崾剑蚴ベ|(zhì)子,由酸式轉(zhuǎn)變?yōu)楣曹棄A式,由于其結構的轉(zhuǎn)變而發(fā)生顏色的變化。
進入核酸分子,形成異常RNA或DNA,影響核酸的功能并導致突變。5-氟尿嘧啶類似尿嘧啶,可進入RNA,與腺嘌呤配對或異構成烯醇式與鳥嘌呤配對,使A-T對轉(zhuǎn)變?yōu)镚-C對。因為正常細胞可將其分解,而癌細胞不能,所以可選擇性抑制癌細胞生長。
提質(zhì)粒是分子生物學中基本,easy的實驗。完全不需要借助大腦,直接照著提取試劑盒中的操作說明傻瓜操作即可(其實應該由機器人在實驗室中操作這些簡單卻耗時的實驗)。盡管操作簡單,提質(zhì)粒卻也是一個比較重要的步驟,提出質(zhì)粒的質(zhì)量和數(shù)量將直接決定著后續(xù)實驗室的成敗。當我們按照試劑盒中操作說明進行操作時,我們會看到P1,P2,N3, PE,EB等不同的溶液(不同試劑盒可能標識不同)。那么大家是否知道每瓶溶液中裝的什么?它們在質(zhì)粒提取過程中的作用又是怎樣的?
pH值,亦稱氫離子濃度指數(shù)、酸堿值,是溶液中氫離子活度的一種標度,也就是通常意義上溶液酸堿程度的衡量標準。這個概念是1909年由丹麥生物化學家S?ren Peter Lauritz S?rensen提出。p代表德語Potenz,意思是力量或濃度,H代表氫離子(H)。有時候pH也被寫為拉丁文形式的pondus hydrogenii。
培養(yǎng)基與菌種分離是從含有多種微生物的樣品中獲得純種微生物的操作技術。菌種分離主要在培養(yǎng)皿上進行,常用的方法是稀釋法和劃線法。使用這兩種方法的目的是是微生物的一個個體通過繁殖,在固體培養(yǎng)基上長出肉眼能見的群體,根據(jù)培養(yǎng)特征,用接種針調(diào)取所需菌種并在顯微鏡下檢查,證明為單一形狀的菌體。常用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。
抽提方法的優(yōu)化?;诒椒拥姆椒ǖ淖畲髥栴}是分層不徹底和部分 RNA 的丟失(不能全部將上清取出)。分層不徹底是因為核酸和蛋白質(zhì)含量高,可以用增加裂解液使用量或者降低樣品量解決。脂肪組織要增加一步氯仿抽提。RNA 的丟失可以用反抽方法或者去除有機層后再離心的方法降低。基于柱離心式方法的最大問題是樣品過量。
B淋巴細胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細胞與非分泌型的骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞,再進一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細胞是既具有瘤的無限生長的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細胞進行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價、單一的特異性抗體.這種技術即稱為單克隆抗體技術。