穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系(穩(wěn)定表達細胞株)指在細胞中持續(xù)穩(wěn)定表達特定基因或干擾特定基因表達。穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的目的基因質(zhì)粒DNA整合到細胞染色體上,使細胞長期穩(wěn)定表達該基因。穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株包括多克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株和單克隆穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株。慢病毒感染目的細胞后,通過抗性基因篩選得到的細胞株是多個細胞克隆的組合。單克隆細胞株是從多克隆細胞中經(jīng)細胞克隆挑選得到的,由一個細胞擴增得到的細胞株。單克隆細胞株性狀統(tǒng)一,傳代過程中細胞的基因表達保持穩(wěn)定。
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)是一種常用的血清學(xué)檢測方法,可以用于檢測各種生物分子,如抗體、抗原等。在ELISA實驗中,將抗原或抗體包被在固相載體上,加入待測樣本,再加入酶標抗體或抗原,最后加入底物顯色。通過顯色情況來判斷待測樣本中是否含有目標抗原或抗體。
將動物組織或細胞分散成單個細胞,在模擬機體內(nèi)的生長環(huán)境條件下,使其在體外環(huán)境繼續(xù)生長增殖的過程,稱為細胞培養(yǎng)。
染色是生物顯微玻片標本制作中最重要的環(huán)節(jié)之一。先把破壞細胞膜的選擇透過性,再使用染色劑,將生物組織浸入染色劑內(nèi),使組織細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色或深度不同的顏色,產(chǎn)生不同的折射率,以便觀察。
根據(jù)實驗室使用標準物質(zhì)的具體情況和影響因素來確定期間核查的標準物質(zhì)。標準物質(zhì)在使用過程中影響穩(wěn)定性和準確性的因素很多, 它受化學(xué)、物理和生物等因素的影響。
將一般細菌的菌種純化后接種于普通肉湯管,4~6h增菌后,加入適量甘油一生理鹽水保存液,-20℃冰箱保存;鏈球菌屬和奈瑟氏菌屬的菌株純化后接種于血清肉湯管,在5%~10%CO2中經(jīng)8~10h增菌后,加入適量保存液,80℃低溫冰箱保存;真菌菌種純化后直接取菌洗入肉湯,不做培養(yǎng),加入保存液后,-20℃冰箱保存。結(jié)果在連續(xù)3年實驗期內(nèi),各菌種保存效果良好,且其形態(tài)結(jié)構(gòu)、染色特性、生化反應(yīng)等與標準株相符。結(jié)論使用甘油生理鹽水保存法來保存菌種,各菌種保存時間長,方法簡便,特別是使鏈球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般實驗室得以保存。
細胞免疫熒光(Immunofluorescence, IF)是一種常用的技術(shù),用于檢測細胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)或其他分子的分布和表達情況。分析細胞免疫熒光的結(jié)果涉及多個步驟,包括圖像采集、圖像處理、定量分析和數(shù)據(jù)解釋。以下是詳細的步驟和方法: